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參考價	面議

產(chǎn)品簡介

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	50T
應(yīng)用領(lǐng)域	化工	主要用途	僅供科研實(shí)驗(yàn)
英文名稱	Borrelia spp.PCR	規(guī)格	50T

螺旋體通用PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：傳染性非典型肺炎病毒PCR檢測試劑盒
傳染性膿皰病毒PCR檢測試劑盒
傳染性胃腸炎病毒PCR檢測試劑盒
傳染性胸膜肺炎PCR檢測試劑盒

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒

詳細(xì)介紹

實(shí)時熒光定量PCR：
實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限,，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中,，通過對每個樣品Ct值的計(jì)算,，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此，實(shí)時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期（對數(shù)期）,，此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性,，即同一模板不同時間擴(kuò)增或同一時間不同管內(nèi)擴(kuò)增,，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,，可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,，因此，實(shí)時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法,。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的,、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,，重現(xiàn)性定量方法,，已得到，廣泛用于基因表達(dá)研究,、轉(zhuǎn)基因研究,，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域,。

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計(jì)引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實(shí)物保存,。

產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格
螺旋體通用PCR檢測試劑盒	Borrelia spp.PCR	50T

下列相關(guān)產(chǎn)品：
克雷伯菌通用PCR檢測試劑盒

克里米亞剛果出血熱病毒PCR檢測試劑盒

克羅諾桿菌通用PCR檢測試劑盒

克柔念珠菌PCR檢測試劑盒

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶（2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保7min,。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測,。

定量PCR方法：
a、競爭法　　產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴(kuò)增（其中一個引物為熒光標(biāo)記）。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,，分別測定熒光強(qiáng)度,，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時,，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增,。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,，分別測定其熒光強(qiáng)度，以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板,。
c,、PCR－ELISA法
利用di高辛等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,，再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物,，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),，若加入內(nèi)標(biāo),，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的,。

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品：
5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine 25961-11-9 中文名：分子式：C16H14ClNO 度：98.0% 關(guān)鍵詞：小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T

5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 3543-74-6 中文名：分子式：C18H27N3O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞：小鼠抗利尿激素elisa試劑盒小鼠抗利尿激素試劑盒規(guī)格型號：96T/48T 小鼠抗利尿激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠抗利尿激素試劑盒、小鼠抗利尿激素eisa試劑盒保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月,。

5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 29927-08-0 中文名：5,6-二-2-苯并噻唑胺分子式：C9H10N2S 度：98.0% 關(guān)鍵詞：小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體elisa試劑盒小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒規(guī)格型號：96T/48T 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒,、小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體eisa試劑盒保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。

5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 147086-79-1 中文名：分子式：C8H8OS2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAelisa試劑盒小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒規(guī)格型號：96T/48T 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒,、小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAeisa試劑盒保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月,。

5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one 115473-15-9 中文名：分子式：C7H10ClNOS 度：98.0% 關(guān)鍵詞：小鼠抗紅細(xì)胞抗體elisa試劑盒小鼠抗紅細(xì)胞抗體試劑盒規(guī)格型號：96T/48T 小鼠抗紅細(xì)胞抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠抗紅細(xì)胞抗體試劑盒、小鼠抗紅細(xì)胞抗體eisa試劑盒保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月,。