詳細(xì)介紹
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,,各區(qū)實驗服、儀器 ,、耗材應(yīng)獨立使用,,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作,;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,,并應(yīng)瞬時離心,。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放,。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置,;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄,。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,,設(shè)計并合成引物,,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱:羅斯河病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
貨號:GOY-M6360
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫,、避光,快遞免費送貨上門,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個細(xì)菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),,一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,,無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板,??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細(xì)胞,、活PCR技術(shù)概論。
TANK TANK抗體 規(guī)格: 0.1ml*
FRMD2/FRMPD1 FRMD2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
XTP4 乙型肝炎病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml*
MARCH6 膜相關(guān)環(huán)指蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml*
SOAT1/ACAT1 膽固醇?;D(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
GLUT1 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml*
PRCP 脯氨酰羧肽酶抗體 規(guī)格: 0.1ml*
CD200/MOX1 膜糖蛋白CD200抗體 規(guī)格: 0.1ml*
TH/T-H glycoprotein TH糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Mouse Anti-human IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml*
C20orf43 20號染色體開放閱讀框43抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1ml*
Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) 磷酸化內(nèi)分泌衍生管內(nèi)皮生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml*
IKB zeta/MAIL protein KB抑制蛋白激酶Ζ抗體 規(guī)格: 0.2ml*
羅斯河病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)vitamin B12 維生素B1268-19-920mg
三道定時器三個
細(xì)胞1.8cm個
X-5大孔吸附樹脂500g瓶
Chromeazurol S 鉻天青S10g瓶
MES 2-(N-啡啉)乙磺酸10g瓶
結(jié)晶紫染色液(2.5%)100ml瓶
Atorvastatin 阿伐他汀1g瓶
MRS Agar MRS瓊脂250g瓶
50 bp DNA Ladder100T支
兔抗猴IgG(免疫血清)0.5ml支
AP標(biāo)記抗體稀釋液100ml瓶
脫脂紗布15米/500g卷
ANNEXIN V-FITC-PI 凋亡檢測試劑盒50T盒