詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定,。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果,。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
ABAb抗腦組織抗體ELISA Kit | ABAb ELISA Kit | GOY-E99679 |
檢測(cè)目的:用于檢測(cè)血漿,血清及相關(guān)液體等樣本,。例如灌洗液,、腦脊液、血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測(cè)種屬:大鼠,、小鼠、豚鼠,、倉(cāng)鼠,、裸鼠、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚,、人,、等動(dòng)植物。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一,、高效,、靈敏、特異的抗體,;
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三,、吸附性能好,,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,;
五,、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。?
性能:
1) 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,,大于等于0.9900,。
2) 靈敏度:檢測(cè)濃度小于1.0 pg/ml。
3)特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
4) 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%。
5) 貯藏:2-8℃,,避光防潮保存,。
6) 有效期:6個(gè)月
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
4.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存,。
6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn),。
雞血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(VE-Cadherin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞二氫硫辛酸脫氫酶(DLD)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SPD)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞內(nèi)肽2(EM2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞滑行蛋白β(TXLNb)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞單胺氧化酶A(MAOA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G1(ABCG1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞糖磷脂酰肌醇(GPI)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞端錨聚合酶1 (TNKS1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞白三烯C4(LTC4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞間隙連接蛋白(Cx)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞胱天蛋白酶11(CASP11)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
ABAb抗腦組織抗體ELISA KitHOXD10 同源盒蛋白HOXD10抗體 規(guī)格: 0.2ml
HAND1 心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Glucagon Receptor 胰高糖素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
GABA Transporter 1/GAT-1 γ氨基丁酸運(yùn)載蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.5ml
DOM3Z DOM3Z蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
CTAG2 瘤/睪抗原2抗體 規(guī)格: 0.2ml
ER-beta 雌激素受體β 抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-IKK beta(Ser476) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格: 0.1ml
CARD10 BCL10結(jié)合蛋白和激活核轉(zhuǎn)錄因子抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-Bik(Thr33) 磷酸化促凋亡Bik蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
ACTRIC/Activin A Receptor Type IC 激活素受體1C抗體 規(guī)格: 0.2ml
C20ORF141 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框141抗體 規(guī)格: 0.2ml
Protor-1 抑制基因Protor1抗體 規(guī)格: 0.2ml
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl,;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl,。
(2)酶標(biāo)板置4℃,,包被過(guò)夜,。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,,間歇搖動(dòng),。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次,。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(6)洗板,,同(4),。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(9)洗板,同(4),。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值,。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn),。