實驗流程:
1. 實驗前標準品,、試劑及樣本的準備,；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時,；
3. 吸棄,，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時,；
4. 洗板3次,；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘,；
6. 洗板5次,；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘,；
8. 加終止液50µL,，立即450nm讀數(shù)。

ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點多,，更加方便我們的科研學(xué)者進行科學(xué)實驗,，是科研實驗的好伙伴。

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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實行,。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量,。加入一定量的PBS,，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。
注意事項：
1.加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作,，以減少實驗時間延長造成的誤差,；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑,；
③作定量試驗時,，使用加樣器加注試劑,，并經(jīng)常校正其準確性，此外,，要做到一份樣本一個移液頭,，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度,，盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察,；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,，因此盡量采用水浴,；
3.洗板：
①手工洗板時,，拍板時要垂直，避免交叉污染,，用力不能過猛,，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出,；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,，或適當增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中,，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物,，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,，要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A,、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,；定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果，酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,，需先預(yù)熱15-30 min再進行測試,。

雞Ⅰ型膠原α2(COL1α2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞內(nèi)皮素1(ET-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞IV型膠原(COL4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞肝脂酶 (LIPC)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞生長因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞間羥腎上腺素(MN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞白介素12 p40(IL-12 p40)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞血管活性肽酶抑制劑(VPI)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞硫氧化還原蛋白(Trx)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞血管緊張素原(AGT)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞蛋白Z(PROZ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雞蛋白磷酸酶1調(diào)控亞基1A(PPP1R1A)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

anti-parotidductAb抗腮腺管抗體ELISA KitCYP7A1  細胞色素P450 7A1抗體/膽固醇7a羥化酶 規(guī)格: 0.2ml

HE4/Epididymal secretory protein E4  附睪分泌蛋白4抗體 0.2ml

Mouse Anti-human IgM/PE  PE標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Rb (Thr821)  磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

HRASLS2  HRAS樣抑制因子2抗體 規(guī)格: 0.2ml

CROT/COT  過氧化物酶體肉堿?；D(zhuǎn)移酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-MAPK8/MAPK9( Thr183+Tyr185)  磷酸化氨基末端激酶2抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-MEK1/MAP2K1(Thr292)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml

TFPI/LACI  組織因子途徑抑制劑抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat anti-human IgG whole serum  羊抗人IgG抗清 規(guī)格: 1ml

Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml

ELYS  轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

DKK3  抑蛋白DKK3抗體 規(guī)格: 0.1ml

COX10  細胞色素c氧化酶10抗體 規(guī)格: 0.1ml

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。*,，酶是一種有機催化劑,，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。