詳細介紹
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服,、儀器 ,、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用,;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進行操作,;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰,、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,,并應(yīng)瞬時離心,。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放,。
6. 為防止熒光干擾,,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記,。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置,;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None,。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可,。由我們提取RNA,,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,,提供實驗報告給您,。
產(chǎn)品名稱:轉(zhuǎn)基因油菜品系RT-73核酸檢測試劑盒
規(guī)格:48T 0.2PCR管
貨號:GOY-M7180
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。
運輸:低溫,、避光,快遞免費送貨上門,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),,一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,,無放射性污染,、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,。可直接用臨床標本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細胞,、活PCR技術(shù)概論。
大鼠血管生長素(ANG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
轉(zhuǎn)基因油菜品系RT-73核酸檢測試劑盒pZFHD1-2(pZFHD12)
細胞計數(shù)液
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit
CCC-HBE-2[CCCHBE2]細胞株
pGL4.40[luc2P MRE Hygro]
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA Kit
包涵體中量純化試劑盒
pTB220
Sodium Carbonate Solution(碳酸鈉溶液),0.5M,pH9.4
人毒休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA Kit
Thioalkalivibrio halophilus medium
pET-5a(pET5a)(60908-2772)
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA Kit
固相內(nèi)毒素清除劑(500g)
pSR2