ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點多,，更加方便我們的科研學(xué)者進行科學(xué)實驗,，是科研實驗的好伙伴。

實驗流程:
1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品,、試劑及樣本的準(zhǔn)備,；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時,；
3. 吸棄,，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時,；
4. 洗板3次,；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘,；
6. 洗板5次,；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘,；
8. 加終止液50µL,，立即450nm讀數(shù),。
?
樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實行,。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4）,，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。
注意事項：
1.加樣：
①實驗樣本過多時,，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差,；
②加酶試劑后,，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時,，使用加樣器加注試劑,，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外,，要做到一份樣本一個移液頭,，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度,，盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察,；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,，因此盡量采用水浴,；
3.洗板：
①手工洗板時,，拍板時要垂直，避免交叉污染,，用力不能過猛,，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出,；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù),；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,；定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進行測試,。

豬核轉(zhuǎn)錄因子Y亞基γ(NFYC)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬血小板激活因子ib3(PAFAHIB3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬生長激素2(GH2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬原纖維蛋白3(FBN3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬髓分化因子88(MYD88)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬前列腺素E合成酶微粒體(PTGES)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬周期素依賴性激酶7(CDK7)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬纖維介素蛋白(FGL2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

豬內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(EPCR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬補體C3轉(zhuǎn)化酶(C3c)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬胰高血糖素(GC)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

豬溶菌酶(LZM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

豬鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

NKB神經(jīng)激肽BELISA Kit穿山龍 CAS  規(guī)格： 5g 訂購|咨詢

朝藿定B CAS 110623-73-9 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

酸軟骨素鈉 CAS  規(guī)格： 250mg 訂購|咨詢

榿木 CAS  規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

甲胎蛋白(AFP) CAS  規(guī)格： 3支/套 免疫測定用 訂購|咨詢

山綠茶 CAS  規(guī)格： 5g 訂購|咨詢

枸櫞酸舒芬太 CAS  規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

比妥 CAS  規(guī)格： 100mg 訂購|咨詢

白土苓（華南肖菝葜） CAS  規(guī)格： 10g 訂購|咨詢

卷柏(卷柏) CAS  規(guī)格： 2g 訂購|咨詢

 CAS  規(guī)格： 1ml 訂購|咨詢

黑豆 CAS  規(guī)格： 5g 訂購|咨詢

銀杏內(nèi)酯C(暫行) CAS  規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

交聯(lián)聚維 CAS  規(guī)格： 100mg 訂購|咨詢

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。*,，酶是一種有機催化劑,，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。