使用方法：
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶,。,，酶是一種有機(jī)催化劑,，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

ELISA Kit檢測(cè)試劑盒優(yōu)點(diǎn)多，更加方便我們的科研學(xué)者進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn),，是科研實(shí)驗(yàn)的好伙伴,。

實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備,；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL,，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄,，加檢測(cè)溶液A100µL,，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次,；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL,，37°C孵育10-20分鐘,；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù),。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
（3）尿液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行,。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用。
注意事項(xiàng)：
1.加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),，可分批次操作,，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差；
②加酶試劑后,，用吸水紙吸干孔外試劑,；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑,，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭,，防止交叉污染,。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時(shí)間的條件,；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,，因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板：
①手工洗板時(shí),，拍板時(shí)要垂直,，避免交叉污染，用力不能過猛,，防止抗原抗體復(fù)合物脫離,；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好,，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù),；
4.顯色：
ELISA試劑盒中,，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,；如以鄰苯二胺(OPD)為底物,，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,，但A,、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。

人參皂苷Rg2(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Ginsenoside Rg2 不吸水鏈霉菌 Streptomyces ahygroscopicus豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

3-(三基硅基)-1-丙鈉(>98.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) Sodium 3-(Trimethylsilyl)-1-propanesulfonate  IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞)RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

SB505124 質(zhì)量規(guī)格：>98% SB-505124  細(xì)胞名稱HT-29, 人結(jié)腸細(xì)胞

分子篩, 5 Å(40-60目,氣相,、液相色譜柱) 質(zhì)量規(guī)格：40-60目,氣相、液相色譜柱Molecular sieves, 5 Å 月桂基鹽胰蛋白胨肉湯/LST肉湯/LST Broth各種食品中大腸菌群近似值(MPN)測(cè)定250克國產(chǎn)/進(jìn)口

新堿 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg 神經(jīng)細(xì)胞分化相關(guān)蛋白AHNAK抗體 CA72-4 ELISA Kit 糖類抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒

羊藿次苷I 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢 人金屬蛋白1E(MT1E)ELISA試劑盒人96T0.47-30 ng/mL大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒,，英文名：PLAUR/uPAR ELISA Kit

穿心蓮內(nèi)酯 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg 載脂蛋白A1抗體 ANP32E ELISA Kit 性富亮氨核蛋白32家族成員E(ANP32E)ELISA試劑盒

扁蓄苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Avicularin 苜蓿中華根瘤菌大麗花輪枝孢

毛蕊異黃苷 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg Bcl-2結(jié)合抑凋亡蛋白2抗體 uPAR ELISA Kit 尿激酶型纖溶酶原激活劑受體(uPAR)ELISA試劑盒

酰螺旋霉素（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定 Acetylspiramycin 自養(yǎng)黃色桿菌 Xanthobacter autotrophicus松口蘑 Tricholoma matsutake

二洛平 訂購|咨詢 規(guī)格： 100mg 人角化細(xì)胞富含脯氨蛋白(KPRP)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠Ⅰ型膠原(COL1)ELISA試劑盒，英文名：COL1 ELISA Kit

吐溫20 質(zhì)量規(guī)格：CP Tween 20 過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白英文名稱：Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)

黃柏（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Obacunone  植物桿菌 Lactobacillus plantarumSKOV3/Taxol-25, 人卵巢紫杉耐藥細(xì)胞株

SLC/CCL21二級(jí)淋巴組織趨化因子ELISA KitL-Arabinose L-阿拉伯糖    Sigma10g

青霉素-鏈霉素-谷氨酰胺(100X)

Penicillin-Streptomycin-Glutamine    含10000U青霉素,，10000ug鏈霉素和29.2mg谷氨酰胺，保存：-5 - -20°10378-016

Selenite cystine enrichment btoth for microbiology    1.07709.0500MERCK默克

Mannitol salt phenol-red agar甘露醇鹽酚紅瓊脂    1.05404.0500MERCK默克

金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基    500mL/瓶

曲霉素瓊脂(AFPA)    250(g)

Todd-Hewitt 肉湯    250(g)

濾膜腸球菌瓊脂    250(g)

泛酸測(cè)定培養(yǎng)基    250用于嬰兒食品和乳粉中泛酸測(cè)定

Tryptone Soya Agar 胰蛋白胨大豆瓊脂現(xiàn)貨    Oxoid500G

麥芽浸膏肉湯 (CM0057)    Oxoid