使用方法：
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。*,，酶是一種有機(jī)催化劑,，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

ELISA Kit檢測(cè)試劑盒優(yōu)點(diǎn)多，更加方便我們的科研學(xué)者進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn),，是科研實(shí)驗(yàn)的好伙伴,。

實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品,、試劑及樣本的準(zhǔn)備,；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí),；
3. 吸棄,，加檢測(cè)溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí),；
4. 洗板3次,；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL，37°C孵育30分鐘,；
6. 洗板5次,；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘,；
8. 加終止液50µL,，立即450nm讀數(shù)。
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行,。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量,。加入一定量的PBS,，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用,。
注意事項(xiàng)：
1.加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差,；
②加酶試劑后,，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí),，使用加樣器加注試劑,，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外,，要做到一份樣本一個(gè)移液頭,，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度,，盡量使用較低的溫育溫度,、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察,；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,，因此盡量采用水浴,；
3.洗板：
①手工洗板時(shí),，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染,，用力不能過猛,，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出,；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中,，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物,，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試,。

雞G蛋白β1(GNβ1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞鈣調(diào)磷酸酶結(jié)合蛋白1(CABIN1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞Apelin 17(AP17)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

雞谷氨酸脫羧酶2(GAD2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞蛋白激酶D1(PKD1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞細(xì)胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞乙酰輔酶A乙酰轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞突觸足蛋白(SYNPO)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1/BCL-X)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞凝溶膠蛋白(GS)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞纖蛋白原(FG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雞成熟促進(jìn)因子(MPF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

SRP抗信號(hào)識(shí)別顆?？贵wELISA KitEXTL  外生性骨疣樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1ml

RSL1D1  細(xì)胞衰老抑制基因蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-Bov IgG/APC  APC標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml

PYGM  肌肉糖原磷酸化酶抗體 規(guī)格: 0.2mlSCF  干細(xì)胞生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAGE-1  黑色素瘤相關(guān)抗原抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-MEF2C(Thr300)  磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-Kidins220 (Ser918)  磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

DNase I  脫氧核糖核酸酶1抗體 規(guī)格: 0.2mlTPD52L1/D53  瘤蛋白D53抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLF9/BTEB1  轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Stat2 (Tyr690)  磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml

PDLIM3/ALP  輔肌動(dòng)蛋白相關(guān)LIM蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlFAM81A  FAM81A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

IDH3A  草酰琥珀酸脫羧酶α抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-mu Opioid Receptor (Ser375)  磷酸化µ-型片受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1798)  磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlPPAR gamma  過氧化酶活化增生受體γ抗體 規(guī)格: 0.2ml

ANKMY1  睪特異性錨樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-SOX9(Ser181)  磷酸化轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

NFIC  核因子1C型抗體 規(guī)格: 0.2mlNuMA  核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

NT/NTS1/NTRH  神經(jīng)降壓素抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-FGFR1(Tyr653/654)  磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生因子受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml