兔肌源性干原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2,，5%

兔肌源性干細胞分離自肌肉組織,；肌源性干細胞（MDSCs）屬于成體多能干細胞,，具有多細胞系分化和自我更新能力。通過誘導刺激,，MDSCs可以分化為脂肪,、骨骼、軟骨,、平滑肌和神經(jīng)細胞等多種細胞和組織類型,；作為基因治療和組織工程的供體細胞,，已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點,；近年來，肌源性干細胞在治療尿失禁等方面的應用逐步得到重視,。需注意的是，肌源性干細胞主要存在于骨骼肌組織中,，只是成熟組織的很少部分細胞,；平時處于靜止狀態(tài),，在細胞應激和組織缺失時才會激活,；并且隨著年齡的增加，所含細胞數(shù)量逐漸減少,，而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進行,。肌源性干細胞的體外擴增對細胞移植和干細胞介導的基因治療至關(guān)重要。對肌源性干細胞的擴增研究發(fā)現(xiàn),，EGF,、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細胞進入有絲分裂周期,，從而刺激細胞增生。更重要的是,，細胞因子誘導的體外擴增可以通過自我更新不刺激細胞分化,，從而保持干細胞表型,。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肌源性干細胞采用膠原酶-蛋白酶-蛋白酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法,，后通過肌源性干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的兔肌源性干細胞經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

CRP Others Rat 大鼠 CRP / C-reactive 人細胞裂解液   HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   CM-R078 小鼠原代三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞 小鼠原代肺微血管內(nèi)皮細胞

CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原

HAGH Protein Human 重組人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白

SERPIND1重組小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein

IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白

SRC重組人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠阻抑素(PHB)試劑盒 ,，英文名： PHB ELISA Kit

Mouse tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒

MouseNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 小鼠神經(jīng)生長導向因子Slit2試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanlungcancerMarkerELISAKit人肺癌標志物

土壤砷元素比色法定量試劑盒20次

ELISAKitA大鼠抗受體

兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔肌源性干原代細胞小鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 大鼠酶2(CA-2)試劑盒

HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 人新生甲狀腺素(NN-T4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanclusterin,CLU試劑盒人凝聚素(CLU)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙?；?span>3(HDAC3)活性比色法定量試劑盒20次

Humaeversei-iodothyronine,3ELISAKit人反三甲狀腺原(3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

SERPINA1A重組小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 蛋白 Protein

堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2)

CETN2重組人 CETN2 / Centrin 2 蛋白 Protein

HIF1A Protein Human 重組人 HIF-1 alpha / HIF1A 蛋白

CD4 Protein Ferret 重組雪貂 CD4 / Leu-3 蛋白