兔晶狀體上皮原代細(xì)胞公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：兔原代晶狀體上皮細(xì)胞 U-2 OS(人骨肉瘤細(xì)胞) HAN 人羊膜細(xì)胞 1ml/T75 HFL1 人肺成纖維細(xì)胞 PANC-1 人胰腺癌細(xì)胞 人原代小氣道平滑肌細(xì)胞

兔晶狀體上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

 

兔晶狀體上皮細(xì)胞分離自晶狀體組織,；晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層,，僅含有上皮細(xì)胞及其產(chǎn)物，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類(lèi)型細(xì)胞分開(kāi),；因而,，晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)既無(wú)神經(jīng)和血管組織的干擾，又不受其它類(lèi)型細(xì)胞如成纖維細(xì)胞的污染,，保證了培養(yǎng)中細(xì)胞成分的單一性,。晶狀體上皮細(xì)胞主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡，包括電解質(zhì)和液體的輸送,。在正常的發(fā)育過(guò)程中,，晶狀體上皮細(xì)胞分化和成熟，然后遷移到晶狀體內(nèi)部,，產(chǎn)生晶體蛋白,，自身也拉長(zhǎng)而變成晶狀體纖維細(xì)胞，并終失去細(xì)胞核和其它的細(xì)胞器,。研究表明,，晶狀體上皮細(xì)胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長(zhǎng)因子的調(diào)控，包括表皮生長(zhǎng)因子和胰島素等,。細(xì)胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形,，呈單層生長(zhǎng)、連成膜狀,。晶狀體上皮細(xì)胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細(xì)胞,，其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān)，體外培養(yǎng)是研究其生長(zhǎng)規(guī)律的主要手段,。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔晶狀體上皮細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔晶狀體上皮細(xì)胞經(jīng)BFSP2（晶狀體蛋白）免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)  牛腎細(xì)胞;MDBK  615小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS  CFPAC-1細(xì)胞,，胰腺癌細(xì)胞 鼻咽癌細(xì)胞系,SUNE-1亞株-5-8F細(xì)胞 CL-0322Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞) 小鼠原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 人原代鞏膜成纖維細(xì)胞

Beta-Amyloid(1-40 0.1mgBeta-Amyloid(1-40) β淀粉樣肽(1-40)(多肽蛋白)

HDAC3 Protein Human 重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

JAM3重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 Protein

ICOS Protein Rat 重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

DCX重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)試劑盒 ，英文名： TFR2 ELISA Kit

Ma beta endorphin (beta -EP) ELISA Kit 馬β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒

Mousesolubleclusterofdiffereiation30,sCD30ElisaKit 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30(sCD30)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanleukoregulin,LRELISAKit人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素

唾液酸(SA)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

ELISAKitAsAb大鼠抗抗體

上腺素   英文名稱(chēng)：   Adrenalin/   英文縮寫(xiě)：   ADR   規(guī)格：  

晚期糖基化終末產(chǎn)物   英文名稱(chēng)：   advanced glycosylation end products   英文縮寫(xiě)：   AGEs   規(guī)格：  

0酸化AKT蛋白   英文名稱(chēng)：   phosphorylation AKT   英文縮寫(xiě)：   p-AKT   規(guī)格：  

轉(zhuǎn)錄因子AP-1   英文名稱(chēng)：   anscription Factors AP-1   英文縮寫(xiě)：   AP-1   規(guī)格：

兔晶狀體上皮原代細(xì)胞小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human brain derived neuroophic factor (BDNF) ELISA Kit 人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒

Humanhighmobilitygroupprotein17,HMG-17ELISAKit 人高速泳動(dòng)蛋白17(HMG-17)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineaPigIerleukin1receptoraagonist,IL-1ra試劑盒豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次

Mousecarbonicanhydrase,CAELISAKit小鼠酶(CA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

KLRK1重組食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 標(biāo)簽) Protein

MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3 0.5mgMAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原

FCGR3B重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白 Protein

GUCA1A Protein Human 重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

PTN Protein Mouse 重組小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。