ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點多，更加方便我們的科研學者進行科學實驗,，是科研實驗的好伙伴,。

實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備,；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL,，37°C孵育1小時；
3. 吸棄,，加檢測溶液A100µL,，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次,；
5. 加檢測溶液B100µL,，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次,；
7. 加TMB底物90µL,，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL,，立即450nm讀數(shù),。
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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清等,。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。
（2）血漿：
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心,。
（3）尿液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實行,。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。
注意事項：
1.加樣：
①實驗樣本過多時,，可分批次操作,，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后,，用吸水紙吸干孔外試劑,；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑,，并經(jīng)常校正其準確性,，此外,，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染,。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察,；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,，因此盡量采用水浴,；
3.洗板：
①手工洗板時,，拍板時要垂直，避免交叉污染,，用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離,；
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出,；
③為了洗滌效果好,，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,，或適當增加洗板的次數(shù),；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,，則提供的底物為A和B兩瓶應用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物,，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,，要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A,、B液應盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應板應水平距離白色背景10-15 cm,；定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,，酶標儀不應置于陽光或強光照射下，需先預熱15-30 min再進行測試,。

小鼠神經(jīng)肽Y(NPY)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠骨鈣素(OC/BGP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠血小板活化因子(PAF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠孕激素/孕酮(Pg)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠降鈣素原(PCT)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠胰島素原(PI)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠S100鈣結(jié)合蛋白B (S100B) 酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1(SDF1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠促甲狀腺素(TSH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠甲狀腺素(T4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠組織因子(TF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

GSH谷胱甘肽ELISA KitSLTM  轉(zhuǎn)綠調(diào)節(jié)因子SLTM抗體 規(guī)格: 0.2ml

CIN85/CD2BP3  CD2結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

C3orf54  3號染色體開放閱讀框54抗體 規(guī)格: 0.2ml

SIPA1L2  信號誘導增相關蛋白1樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

IGFBP2  胰島素樣生因子結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-IRAK1 (Thr209)  磷酸化白介素-1受體相關激酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CTNNBIP1  β鏈接素相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

ACVRL1/ALK1  激活素受體樣激酶1抗體 規(guī)格: 0.2ml

EEF2  真核翻譯延因子2抗體 規(guī)格: 0.2ml

AEV(Avian Encephalomyelitis virus)  禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 0.1ml

Phospho-BRCA1(Ser1423)  磷酸化易感基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/Cy7  Cy7標記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1ml

phospho-STAT5a(Tyr694)  磷酸化信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體 規(guī)格: 0.1ml

CXorf56  X染色體開放閱讀框56抗體 規(guī)格: 0.2ml

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應,，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復5次，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。