詳細介紹
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,,各區(qū)實驗服、儀器 ,、耗材應(yīng)獨立使用,,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2. 為避免RNA降解,,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測,;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),,并單獨存放,。
6. 為防止熒光干擾,,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記,。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置,;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None,。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可,。由我們提取RNA,,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,,提供實驗報告給您,。
產(chǎn)品名稱:Cry3A基因核酸檢測試劑盒
規(guī)格:48T 0.1PCR管
貨號:GOY-M7091
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。
運輸:低溫,、避光,快遞免費送貨上門,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學(xué)中小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng),。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細胞,、活PCR技術(shù)概論,。
人D二聚體(D2D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人DNA結(jié)合蛋白(DBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1 (DNMT1) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人Dickkopf 1(DKK1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人C型鈉尿肽(CNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人C多肽(CP) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人c-sis ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Cry3A基因核酸檢測試劑盒EL4細胞株
pGS3
Bis-is Propane(1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷)
百日咳桿PCR檢測試劑盒
pXPL
is-HCl Buffer,1.0M,pH7.5
人分泌白細胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA Kit
ypticase starch agar
pCMV-Tet3G(pCMVTet3G)(60908-2302)
豬流感病毒A(FLU A)ELISA Kit
壯觀溶液動物總蛋白提取
pT-REx-DEST30(pExDEST30)
MOPS Buffer,1.0M,pH5.5
人OJ抗體/抗異亮氨酰NA合成酶抗體(OJ/IleRS) ELISA Kit
Rhodopseudomonas sulfoviridis medium