小鼠肝內膽管上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2,，5%

小鼠肝內膽管上皮細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,，并在身體里面起著去氧化,、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用,；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機體內臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置,，在右側橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方,。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,，又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機體位置和形態(tài)結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面,，大部分肝為肋弓所復蓋,，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,，肝上面則與膈及腹前壁相接,。通過控制激素調控的分泌和吸收，在保持,、調整和擴大膽小管的結構中發(fā)揮重要作用,，肝內膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%,，其在肝內膽道系統(tǒng)內形成復雜的網狀管形結構,。肝內膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能，參與肝臟的代謝,、排泌,、免疫等生理過程，在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用,。研究表明,，常見的肝內膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病,，都是以肝內膽管上皮細胞為病變靶位,，進而引起肝內膽管上皮損傷。因此，了解正常肝內膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內膽管病變的發(fā)病機制,、診斷和治療具有重要意義,。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠肝內膽管上皮細胞采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,，接種至預先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,，通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠肝內膽管上皮細胞經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

DKK3 Others Mouse 小鼠 Dkk-3 / DKK3 人細胞裂解液   LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液   TACSTD2 Others Human 人 OP2 / TACSTD2 人細胞裂解液 小鼠原代腦皮層神經元細胞 小鼠原代骨骼肌細胞

Tachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor 0.5mgTachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor ) 抗菌肽

CSF1 Protein Human 重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白

BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFRSF10A Protein Human 重組人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 (His & Fc 標簽)

THPO重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 Protein

大鼠中期因子(MK)試劑盒 ，英文名： MK ELISA Kit

Mouse soluble myosin heavy chain 1 (sMHC-1) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)試劑盒

MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 小鼠FMS樣酪激酶3(Flt3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanH-rasELISAKit人H-ras

B1熒光定量試劑盒20次

ELISAKitCav-1大鼠窖蛋白Caveolin1

兔子孕激素試劑盒   兔子孕激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子孕激素試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子孕激素試劑盒,、兔子孕激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月,。

兔子胰島素樣生長因子1試劑盒   兔子胰島素樣生長因子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子胰島素樣生長因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進口分裝）,，產品別名：兔子胰島素樣生長因子1試劑盒、兔子胰島素樣生長因子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月,。

兔子胰島素樣生長因子2試劑盒   兔子胰島素樣生長因子2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子胰島素樣生長因子2試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝）,，產品別名：兔子胰島素樣生長因子2試劑盒,、兔子胰島素樣生長因子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒   兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒,、兔子組織型纖溶酶原激活劑eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月,。

小鼠肝內膽管上皮原代細胞小鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human thrombin thrombomodulin complex regulation (T-TM) ELISA Kit 人血栓調節(jié)蛋白復合物(T-TM)試劑盒

HumanCollagen-likeBioproteinⅡ,HCBⅡELISAKit 人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Heneggphosvitinphosphopeptides,PPP試劑盒雞蛋卵黃高0蛋酸肽(PPP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞線粒體DNA萃取試劑盒10/20次

MouseBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit小鼠β內啡肽受體(β-EPR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FCGRT & B2M重組小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

雌激素受體β(ERβ)重組蛋白 Recombinant Estrogen Receptor Beta (ERb)

EPHA2重組人 EphA2 蛋白 (His 標簽) Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標簽)

CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。