小鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：小鼠原代骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞 HCC94(人鱗癌細(xì)胞（高分化）) C-33A 人細(xì)胞 1ml/T75 OP9 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 K-562 人慢性髓原白血病細(xì)胞 人原代前列腺平滑肌細(xì)胞

小鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代；不建議多次傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

 

小鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞分離自骨髓,；骨髓是機(jī)體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞,、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細(xì)菌,、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體,。因此,，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長(zhǎng)骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,，稱(chēng)為紅骨髓。出生時(shí),，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多,，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,，亦稱(chēng)為成血管細(xì)胞（Angioblast）,，是一群具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù),。研究顯示,，內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病,、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路，EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn),。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞采用沖洗骨髓,、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

DogL1 狗肺成纖維樣細(xì)胞  TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液   CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液   VSIG2 Others Human 小鼠原代毛囊干細(xì)胞 小鼠原代脾基質(zhì)細(xì)胞

Somatostatin/GRIH 抗原 0.5mgSomatostatin/GRIH 抗原

CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白

TMEM25重組人 TMEM25 蛋白 Protein

PIGR Protein Human 重組人 PIGR 蛋白 (365 Ser/Gly, His 標(biāo)簽)

EFNB2重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)試劑盒 ,，英文名： ADIPOR2 ELISA Kit

Mouse soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒

MouseGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit 小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanhiston-H2bELISAKit人組蛋白H2b

B3比色法定量試劑盒20次

ELISAKitCollagenaseII大鼠膠原酶II

小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子-1   英文名稱(chēng)：   Soluble Iercellular Adhesion Molecule-1   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   sICAM-1

小鼠干擾素-α   英文名稱(chēng)：   Ierferon α   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IFN-α

小鼠干擾素-β   英文名稱(chēng)：   Ierferon β   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IFN-β

小鼠干擾素-γ   英文名稱(chēng)：   Ierferon γ   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IFN-γ

小鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞小鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human thrombin receptor () ELISA Kit 人受體()試劑盒

Humansmallnuclearribonucleoprotein,sNP/SmELISAKit 人抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBG試劑盒倉(cāng)鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母氧化酶活性測(cè)定試劑盒20次

MouseBeta-naphthol,β-NphELISAKit小鼠β萘酚(β-Nph)試劑盒規(guī)格：96T/48T

PREP重組小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白 Protein

鈣非依賴(lài)性0脂酶A2(iPLA2)重組蛋白 Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)

MAP1LC3B重組人 LC3B / MAP1LC3B 蛋白 Protein

DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

CXCL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白

客戶(hù)收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶(hù)收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。