小鼠角膜上皮原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠原代角膜上皮細(xì)胞 MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞) HSAS3 人皮膚成纖維細(xì)胞 1ml/T75 HBMEC 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 3T3-L1 Swiss albion小鼠脂肪細(xì)胞 人原代胚肺成纖維細(xì)胞

小鼠角膜上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

 

小鼠角膜上皮細(xì)胞分離自眼角膜組織,；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6,，從后面看角膜呈正圓形,，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,，中央部最薄,。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜,，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛,。為了保持透明，角膜并沒(méi)有血管,，透過(guò)外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層,、前彈力層、基質(zhì)層,、后彈力層,、內(nèi)皮細(xì)胞層。其主要功能如下：①角膜是的無(wú)血管的組織,，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,，分三層細(xì)胞層，外層即是上皮細(xì)胞,；②角膜上皮細(xì)胞能參與先天性免疫,，能感應(yīng)病原體存在并發(fā)出信號(hào)從而激活角膜防御系統(tǒng),；③角膜上皮細(xì)胞能高效表達(dá)醛脫氫酶。角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)研究角膜的生理學(xué),、病理學(xué),、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段，常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物,、病毒感染,、各種生長(zhǎng)因子和藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠角膜上皮細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠角膜上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3,、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細(xì)胞裂解液   NEI-H209細(xì)胞,，小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,22RV1細(xì)胞 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞RNAHCPF miRNA5 μg  FGFR3 Others Mouse 小鼠 FGFR3 小鼠原代口腔黏膜上皮細(xì)胞 小鼠原代肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

大鼠載脂蛋白E(APOE)試劑盒 ,，英文名： APOE ELISA Kit

Mouse phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒

MouseIerleukin9,IL-9ELISAKIT 小鼠白介素9(IL-9)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanfractalkine/CX3CL1ELISAKit人趨化因子

細(xì)胞/組織多聚賴載玻片制備試劑盒5次(50至100片)

ELISAKitMMP-9大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B

小鼠甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺素(T4)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)試劑盒   96T/48T

小鼠角膜上皮原代細(xì)胞小鼠0酸化基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human prostaglandin D syhase (PGDS) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶(PGDS)試劑盒

HumanBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit 人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAdenovirusIgM,ADV-IgM試劑盒人腺病毒IgM(ADV-IgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動(dòng)力比色法定量試劑盒20次

Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1,AFP-L1ELISAKit小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL17RA重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 Protein

GHR (growth hormone receptor 0.5mgGHR (growth hormone receptor) 生長(zhǎng)激素受體(抗原)

CASK重組人 CASK Kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

DDR1 Protein Human 重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (aa 444-913, His & GST 標(biāo)簽)

FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白