小鼠浦肯野原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠原代浦肯野細(xì)胞 293ET(人胚細(xì)胞（SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞）) HMSC-bm 人間充質(zhì)干細(xì)胞－骨髓 1ml/T75 Lewis 小鼠肺癌細(xì)胞 RES 大鼠胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞 人原代角膜基質(zhì)細(xì)胞

小鼠浦肯野原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性 不增殖,；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

 

小鼠浦肯野細(xì)胞分離自小腦皮質(zhì)組織,；小腦的表面被覆著一層灰質(zhì)，叫小腦皮質(zhì),，小腦皮質(zhì)分為3層,，從表及里分別為分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層,。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞,、籃狀細(xì)胞、浦肯野細(xì)胞,、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元,。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維，終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核,。浦肯野細(xì)胞（Purkinje cell）是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的能夠傳出沖動(dòng)的神經(jīng)元,。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬(wàn)個(gè)浦肯野細(xì)胞。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室,。顯著的電生理特點(diǎn)是傳導(dǎo)性強(qiáng),，傳導(dǎo)速度快,，可達(dá)4000mm/s。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞,，具有舒張期自動(dòng)除極化的性能,，因而有自律性，但自律性強(qiáng)度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞,。這類細(xì)胞常常平行排列,，細(xì)胞內(nèi)電阻低，只有心室細(xì)胞的1/3,。小腦：浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中最大的神經(jīng)元,，細(xì)胞體呈梨形，頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹(shù)突,，向外伸入分子層,。主樹(shù)突沿途分支繁茂，形如展開(kāi)的,、扁薄的扇形,，鋪展在與小腦葉片長(zhǎng)軸垂直的平面上。樹(shù)突分支上有大量的樹(shù)突棘,，與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系,，接受傳入小腦的全部信息。軸突由細(xì)胞底部（與主樹(shù)突相對(duì)方向）發(fā)出,，細(xì)長(zhǎng),，離開(kāi)胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維，向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開(kāi)皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì),，組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,，終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán)。一個(gè)浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個(gè)終末膨大,，約與小腦深部核團(tuán)的35個(gè)神經(jīng)元形成突觸,。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列，幾個(gè)細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個(gè)小束,，小束外包繞著基底膜,。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少，胞漿區(qū)內(nèi)充滿糖原顆粒,、線粒體和肌漿網(wǎng),，細(xì)胞內(nèi)電阻低，只有心室細(xì)胞的1/3,。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無(wú)橫管系統(tǒng),，但膜電容比收縮細(xì)胞大,，可能是由于其閏盤(pán)結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜,，提供了較大的表面積的緣故,。浦肯野細(xì)胞閏盤(pán)的主要成分是縫隙連接，粒著膜占的比例很少,，這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ),。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠浦肯野細(xì)胞采用蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠浦肯野細(xì)胞經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3,、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

EL4IL-2細(xì)胞,，淋巴瘤細(xì)胞 人急性早幼粒白血病細(xì)胞,NB4細(xì)胞 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)  NCI-H345細(xì)胞,，人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,Neuro-2a細(xì)胞 CM-H119人腦膜細(xì)胞人腦血管平滑肌細(xì)胞 小鼠原代角膜基質(zhì)細(xì)胞 人原代尾椎腫瘤細(xì)胞

ERK(Extracellular signal-regulated kinase 0.5mgERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原

ENPP2 Protein Human 重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白

IL25重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CNTNAP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白

FGFR4重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein

大鼠乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)試劑盒 ，英文名： ChAT ELISA Kit

Porcine platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)試劑盒

ELISA 小鼠Active Caspase-8  進(jìn)口分裝

CLIAKitforLPA(MouseL-phenylalanine)ELISAKit小鼠苯

通用型1毫升1厘米光徑石英比色皿1個(gè)

ELISAKitEGF雞表皮生長(zhǎng)因子

兔內(nèi)皮抑素(rabbit ES)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔內(nèi)啡肽-b(rabbit Endorphin-b)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔雌二醇(rabbi E2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔上腺素(rabbit EPI)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠浦肯野原代細(xì)胞小鼠膽囊收縮素8(CCK-8)試劑盒

Rat thrombin receptor () ELISA Kit 大鼠受體()試劑盒

HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前腦素(-proBNP)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanAialNaiureticPeptide,ANP試劑盒人心肽(ANP)試劑盒

植物源性食品羽扇豆(lupine)試劑盒20次

Humahrombopoietin,，TPOELISAKit人血小板生成素(TPO)試劑盒

RBP4重組大鼠 RBP4 蛋白 Protein

HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mgHPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原

PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CLDN11 Protein Human 重組人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)