小鼠臍靜脈內(nèi)皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞分離自臍帶組織；它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一,，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換,。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒,。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。

ELK1 Others Human 人 ELK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   22RV1(人前列腺癌細胞)     腸粘膜上皮細胞Many   中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1  中國倉鼠肺細胞;V79  Pcc4 小鼠畸胎瘤細胞 小鼠原代甲狀腺上皮細胞 小鼠原代肺巨噬細胞

PAR-2 (Protease-activated receptors-2 0.5mgPAR-2 (Protease-activated receptors-2) 蛋白酶激活受體-2抗原

CCL20 Protein Human 重組人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白

HA重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

AZU1 Protein Human 重組人 AZU1 / Azurocidin 1 / CAP37 蛋白

SUV420H2重組人 SUV420H2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠乙酰羧化酶α(ACACα)試劑盒 ，英文名： ACACα ELISA Kit

Mouse Annexin V (ANX- V) ELISA Kit 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒

MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkit 小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumandermato-poin,DPTELISAKit人皮膚蛋白

細胞Akt2/PKBβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKiANKL大鼠核因子κB受體活化因子配基

小鼠腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒   96T/48T

小鼠腦脊髓病毒（TMEV）試劑盒   96T/48T

小鼠腦紅蛋白(NGB)試劑盒   96T/48T

小鼠腦啡肽（ENK）試劑盒   96T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠臍靜脈內(nèi)皮原代細胞小鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat coagulation factor III (F III) ELISA Kit 大鼠Ⅲ(FⅢ)試劑盒

Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKit 人脂蛋白α(Lp-α)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBcellgrowthprotein,BCGF試劑盒人B細胞生長因子(BCGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物源性飼料玉米試劑盒20次

Humahioredoxin,xELISAKit人硫氧化還原蛋白(x)試劑盒規(guī)格：96T/48T

TSPAN7重組食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL-23R(Interleukin-23 receptor 0.5mgIL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原

PKM重組人 PKM2 / OIP3 蛋白 Protein

DPEP2 Protein Human 重組人 DPEP2 / MBD-2 蛋白

CD59A Protein Mouse 重組小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 蛋白 (Fc 標簽)

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2,、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。