小鼠腮腺原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

小鼠腮腺細胞分離自腮腺組織；腮腺是哺乳類動物口腔中位于下頜角處的最大唾液腺,，位于外耳道的前下方,，下頜后窩內(nèi)及下頜支的深面。腮腺也是某些無尾目動物頸部有毒皮膚腺的聚集體,；唾液腺有3對,，腮腺、舌下腺和頜下腺,，其中最大的一對是腮腺,。腮腺細胞是高度分化的上皮源性細胞，是一種營養(yǎng)需要復(fù)雜,、在一般合成培養(yǎng)基中不易生長,，體外培養(yǎng)比較困難。目前,，DMEM培養(yǎng)液被認為較適于腺細胞的培養(yǎng),。加入一定量的血清更有利于細胞的生長、增殖與分化,。另外,，接種的細胞密度也是培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素之一，尤其是在腺細胞這種單層細胞培養(yǎng)時,，接種的細胞總數(shù)量和生長基質(zhì)表面的細胞密度對整個細胞的生長均有影響,。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠腮腺細胞采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化后差速貼壁，結(jié)合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠腮腺細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細胞 Rattus  Li-7 人肝癌細胞  人胰腺腺泡上皮癌;HPAC  MDA-MB-415人腺癌細胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15+15%FBS  人表皮角質(zhì)細胞-新生兒(HEK-n) 小鼠原代脊髓微血管內(nèi)皮細胞 人原代肺成纖維細胞

補體成分4a(C4a)重組蛋白 Recombinant Complement Component 4a (C4a)

FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白

ART4重組小鼠 ART4 / CD297 蛋白 Protein

TEK Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Tie2 / TEK 蛋白 (Fc 標簽)

COX5B重組人 COX5B 蛋白 Protein

大鼠胰高血糖素樣肽1(GLP1)試劑盒 ，英文名： GLP1 ELISA Kit

Mouse endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒

MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit人胞漿免疫球蛋白

細胞ATP酶活性染色試劑盒50次

ELISAKitCasp-9大鼠胱天蛋白酶9

唾液酸（SA）測試盒（帶SA標準）   Saliva acid (SA) test case (with SA standard)

肝素溶液   Heparin solion

肝素抗凝管   Heparin aicoagula tube

肝素抗凝管   Heparin aicoagula tube

小鼠腮腺原代細胞小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human peptidylprolyl CIS ans isomerase (PPI) ELISA Kit 人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)試劑盒

HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBcelldifferetiationfactor,BCDF試劑盒人B細胞分化因子(BCDF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物源性飼料油菜籽(rapeseed)試劑盒20次

Humahrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit人纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CHODL重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白  Protein

Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原 0.5mgGelsolin 凝溶膠蛋白抗原

FH重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白 (His 標簽) Protein

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 標簽)

BLMH Protein Mouse 重組小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 (His 標簽)

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。