小鼠胰腺導(dǎo)管上皮原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠原代胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 IAR20(大鼠肝細(xì)胞) AsPC-1 人胰腺癌細(xì)胞 1ml/T75 PC-12（高分化） 大鼠上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（高分化） CRFK 貓細(xì)胞 大鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2,，5%

 

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液,，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有,、。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞,、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞,。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖,；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖,；γ細(xì)胞分泌,，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌,；PP細(xì)胞分泌胰多肽,，抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮,。成體胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞作為胰腺前體細(xì)胞,，已證實(shí)具多向分化潛能，在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細(xì)胞,，胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞免疫原性如何,，轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞在治療糖尿病時(shí)是否發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，對(duì)干細(xì)胞臨床治療糖尿病具有重要意義,。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、差速貼壁法,，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kit  LTEP-a-2(人肺腺癌細(xì)胞)     FOLR2 Others Human 人 FOLR2 / FBP 人細(xì)胞裂解液   人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1  NCI-H716 小鼠原代睪丸支持細(xì)胞 大鼠原代睪丸支持細(xì)胞

NKG2A/CD159a/KLRC1 NK細(xì)胞受體2A/自然殺傷細(xì)胞活化性受體2A抗原 0.5mgNKG2A/CD159a/KLRC1 NK細(xì)胞受體2A/自然殺傷細(xì)胞活化性受體2A抗原

ICAM4 Protein Human 重組人 ICAM4 / CD242 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL1B重組兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein

REG3B Protein Mouse 重組小鼠 REG3B / Pap1 蛋白

FOLR1重組人 FOLR1 / Folate receptor alpha 蛋白 Protein

大鼠血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)試劑盒 ,，英文名： AngⅠ ELISA Kit

Mouse ischemia modified albumin (IMA) ELISA Kit 小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒

Mouseconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISAKit 小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanapoproteinA1,apo-A1ELISAKit人載脂蛋白A1

細(xì)胞ERK1/2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitMCP-3/CCL7大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3

小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL）試劑盒   96T/48T

小鼠氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）試劑盒   96T/48T

小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒   96T/48T

小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒   96T/48T

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮原代細(xì)胞小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Hei Amy Ba aigen ELISA Kit 人痢疾內(nèi)阿米巴抗原試劑盒

Humanprostacycline,PGIELISAKit 人前列環(huán)素(PGI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chickenadrenomedullin,ADM試劑盒雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞AKT蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

NAALADL1重組小鼠 NAALADL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

半乳糖凝集素1(GAL1)重組蛋白 Recombinant Galectin 1 (GAL1)

ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977) Protein

FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。