小鼠胰腺上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。

小鼠胰腺上皮細胞分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道,。,。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質,、脂肪和糖的作用,。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞,、β細胞,、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,，升高血糖,；β細胞分泌胰島素，降低血糖,；γ細胞分泌,，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌,；PP細胞分泌胰多肽,，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮,。胰腺干細胞在發(fā)育上被認為分離自內胚層胰腺上皮,，在隨后的胰腺發(fā)育過程中，胰腺干細胞分化為胰島細胞（α,、β,、δ、PP細胞）,、導管上皮細胞以及腺泡細胞,。胰腺組織中還存在大量的間充質來源的細胞，包括成纖維細胞、血管內皮細胞,、血管平滑肌細胞以及星形細胞,，其中以成纖維細胞占主要部分。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細胞就要排除間充質來源的細胞,，尤其是成纖維細胞,。目前常用的去除成纖維細胞方法有機械刮除法、消化以及膠原酶消化法等,，胰腺上皮細胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義,。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠胰腺上皮細胞采用膠原酶分次消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠胰腺上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

GLA Others Human 人 GLA / Alpha-galactosidase A 人細胞裂解液   WISH人羊膜細胞 Human WISH cells MEM(GIBCO)+10%FBS  CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人細胞裂解液   TDGF1 Protein Rat 小鼠原代睪丸內膜成纖維細胞 大鼠原代小梁網(wǎng)細胞

HDAC1/HD1(histone deacetylase 1 0.5mgHDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 組織蛋白去乙?；?抗原

EPHA2 Protein Human 重組人 EphA2 蛋白 (aa 585-976, His & GST 標簽)

LCN2重組大鼠 LCN2 / NGAL 蛋白 Protein

CD79B Protein Mouse 重組小鼠 CD79B / B29 蛋白

DSC2重組人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 Protein

大鼠血管非性蛋白1(VNN1)試劑盒 ,，英文名： VNN1 ELISA Kit

Plas of 25 hydroxy vitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA kit E 植物25羥基3(25(OH)試劑盒D3/25 HVD3)試劑盒E

MousePlateletFactor4,PF-4ELISAKit 小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanapelin12,AP12ELISAKit人apelin12

細胞ERK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitMCP-2/CCL8大鼠單核細胞趨化蛋白2

小鼠FMS樣酪酸激酶3配體(Flt3L)試劑盒   96T/48T

小鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)試劑盒   96T/48T

小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒   96T/48T

小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)試劑盒   96T/48T

小鼠胰腺上皮原代細胞小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human somatostatin (SS) ELISA Kit 人(SS)試劑盒

HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit 人胰多肽(PP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-Sa-aibody試劑盒人抗Sa抗體(ai-Sa-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細胞周期G2期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

HumaU3AProteinELISAKit人TU3A蛋白(TU3A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)

MAX重組人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白

CD34 Protein Rat 重組大鼠 CD34 蛋白 (Fc 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。