詳細(xì)介紹
本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),,不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用,!
產(chǎn)品名稱:大鼠表皮成纖維原代細(xì)胞
英文名稱:
規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:GOY-01X1155
分類:大鼠原代細(xì)胞
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
包被條件 | |
培養(yǎng)基 | 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
傳代特性 | 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳 |
消化液 | 0.25% |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%,;CO2,,5% |
大鼠表皮成纖維細(xì)胞分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,,由胚胎時(shí)期外胚層形成,,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),,由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層,即基底層,、棘層,、顆粒層、透明層和角質(zhì)層,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮成纖維細(xì)胞采用先蛋白酶消化,、后蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
準(zhǔn)備DMEM高糖,,10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,。
1)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
2)凍存液:90%培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
2,、細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) REN Others Mouse 小鼠 REN1 / Renin-1 人細(xì)胞裂解液 小鼠原代肝成纖維細(xì)胞 小鼠原代腸巨噬細(xì)胞
內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白 Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)
CD5L Protein Human 重組人 CD5L / API6 蛋白
CTSL1重組人 Cathepsin L1 / CTSL1 蛋白 Protein
NP Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP
PILRA重組人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠硝基酪酸()試劑盒 ,,英文名: ELISA Kit
Mouse heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒
MouseCoicosterone,COELISAKit 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanankyrinB,Ank-BELISAKit人錨蛋白B
細(xì)胞GSK3激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitE3大鼠雌三醇
小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠(FA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠表皮成纖維原代細(xì)胞小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ierferon induced protein 10 (IP-10/CXCL10) ELISA Kit 大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒
HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit 人0酸葡萄糖變位酶(PGM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Camellipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2試劑盒脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
玉米樣品處理試劑盒20次
MouseinhibinB,INH-BELISAKit小鼠抑制素B(INH-B)試劑盒規(guī)格:96T/48T
SELPLG重組小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 Protein
膠質(zhì)細(xì)胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1(GFRα1)重組蛋白 Recombinant Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor Receptor Alpha 1 (GFRa1)
DBI重組人 DBI / ACBD1 蛋白 Protein
FAS Protein Human 重組人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白
TNF Protein Canine 重組狗 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A 蛋白
1,、收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系,。
2,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子等,。
3、用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,,隔天再取出觀察,。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,,請拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4,、請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的培養(yǎng)基,。
5、建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和微生物菌種查詢網(wǎng)技術(shù)部溝通交流。
6,、該細(xì)胞只能用于科研,,不得用于臨床應(yīng)用,。