ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求,，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標本因素,；
②試劑因素；
③操作因素,。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,，必能得出準確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務,！

檢測目的：用于檢測血漿,，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液,、腦脊液,、血清、血漿,、尿液,、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本.
檢測種屬：大鼠,、小鼠、豚鼠、倉鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人、等動植物,。
具有如下優(yōu)點：
    一,、高效、靈敏,、特異的抗體,；
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性,；
三,、吸附性能好，空白值低,，孔底透明度高的固相載體,；
四、適用血清,、血漿,、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標本類型,；
五、性價比非常好,，節(jié)省實驗經(jīng)費,。

性能：
1) 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900,。
2) 靈敏度：檢測濃度小于1.0 pg/ml,。
3)特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。
4) 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。
5) 貯藏：2-8℃,，避光防潮保存。
6) 有效期：6個月
注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
5.底物請避光保存,。
6.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
7.所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。

腦動脈血管平滑肌細胞 1×106 5×106

腦靜脈血管內(nèi)皮細胞 1×106 5×106

腦靜脈血管平滑肌細胞 1×106 5×106

腦微血管內(nèi)皮細胞 1×106 5×106

小梁網(wǎng)細胞 1×106 5×106

視網(wǎng)膜色素上皮細胞 1×106 5×106

視網(wǎng)膜müller細胞 1×106 5×106

虹膜色素上皮細胞 1×106 5×106

晶狀體上皮細胞 1×106 5×106

角膜上皮細胞 1×106 5×106

角膜內(nèi)皮細胞 1×106 5×106

視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 1×106 5×106

視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞 1×106 5×106

表皮角化細胞 1×106 5×106

BRCA-1乳腺癌易感蛋白1ELISA KitPhospho-NMDAR1(Ser896)  磷酸化谷氨酸受體1抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Tuberin/TSC2(Ser1420)  磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

FXR1  脆性X相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlBASC4  擴增序列蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-rat IgG/Gold  膠體金標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 2mlNG2/CSPG4  黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白多糖4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Smac/DIABLO  線粒體促凋亡蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-TAK1(Ser412)  磷酸化轉(zhuǎn)化生因子β活化激酶1 規(guī)格: 0.1ml

LTB4-R2  白三烯B4受體2抗體 規(guī)格: 0.1mltubulin Beta  微管蛋白β tubulin抗體 Tubulin β 規(guī)格: 0.1ml

AXL/UFO  粘附相關(guān)激酶抗體 規(guī)格: 0.1mlODC  鳥氨酸脫羧酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1mlCSFV/Classical swine fever virus  豬瘟病毒抗體 0.2ml

HEC1  細胞高表達蛋白Hec1抗體 規(guī)格: 0.2mlDCAF12/WDR40A  睪中心體相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlZnT-1  鋅轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Jun B  活化蛋白激酶B抗體 規(guī)格: 0.1mlCCDC5  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/FITC  FITC標記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.3mlRab27a  RAM-11抗體 規(guī)格: 0.2ml

C4orf14  4號染色體開放閱讀框14抗體 規(guī)格: 0.2mlglypican 3/GPC3  磷脂?；嫉鞍拙厶?3抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-IKK gamma (Ser376)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 規(guī)格: 0.1mlLGI1/ETL1  富含亮氨酸膠質(zhì)瘤失活蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CARD15  凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體 規(guī)格: 0.2mlDonkey Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7標記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔,，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl,；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl,。 
（2）酶標板置4℃,，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后,，即甩去）,，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘,，間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次,。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min,。 
（6）洗板，同（4）,。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min,。 
（9）洗板,，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl,，輕輕混勻10s,，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應,。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后,，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準,。