大鼠胚胎成纖維原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞 SF767(人腦瘤細(xì)胞) CAL-27 人鼻咽癌細(xì)胞 1ml/T75 RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 L W-3A 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 大鼠原代腦膜細(xì)胞

大鼠胚胎成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

 

大鼠胚胎成纖維細(xì)胞分離自胚胎；成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的胚胎成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長(zhǎng),，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦,、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞常用作ES細(xì)胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細(xì)胞,，能產(chǎn)生抑制ES細(xì)胞自主分化和促進(jìn)ES細(xì)胞增殖的因子,，故能有效地促進(jìn)ES細(xì)胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性，且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子,，而且可以為ES細(xì)胞的培養(yǎng)提供類似于體內(nèi)的微環(huán)境,，故在研究哺乳動(dòng)物ES細(xì)胞中得到廣泛使用。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚胎成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚胎成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1,、取出細(xì)胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。

IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細(xì)胞裂解液   E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細(xì)胞)     豬細(xì)胞;ST  星形細(xì)胞生長(zhǎng)添加物SteCGS  大鼠癌細(xì)胞;MADB106  MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞 兔原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞 小鼠原代三叉神經(jīng)元細(xì)胞

MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7 0.5mgMMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質(zhì)金屬蛋白酶-7(抗原)

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽)

YWHAB重組食蟹猴 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein

ESM1 Protein Mouse 重組小鼠 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein

大鼠胎球蛋白B(FETUB)試劑盒 ，英文名： FETUB ELISA Kit

Mouse glucocoicoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 小鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)試劑盒

RatCalcitonin,CTELISAKit 大鼠降鈣素(CT)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHLA-A(HumanleukocyteaigenA)ELISAKit人類白細(xì)胞抗原A

細(xì)胞PKG-Iβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBF大鼠B因子

小鼠17-類固醇(17-KS)試劑盒   96T/48T

小鼠17羥孕(17-OHP)試劑盒   96T/48T

小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)試劑盒   96T/48T

小鼠16α羥基雌1(16-αOHE-1)試劑盒   96T/48T

大鼠胚胎成纖維原代細(xì)胞小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒

Human aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 人水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒

Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 人酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanapelin13,AP13試劑盒人apelin13(AP13)試劑盒

植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)熒光測(cè)定試劑盒(次氯酸離子)20次

Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒

ACPP重組小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 Protein

半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白 Recombinant Galectin 4 (GAL4)

AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 Protein

FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白

IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白