實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品,、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL,，37°C孵育1小時(shí),；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100µL,，37°C孵育1小時(shí),；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,，37°C孵育30分鐘,；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL,，37°C孵育10-20分鐘,；
8. 加終止液50µL,，立即450nm讀數(shù)。

ELISA Kit檢測(cè)試劑盒優(yōu)點(diǎn)多,，更加方便我們的科研學(xué)者進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn),，是科研實(shí)驗(yàn)的好伙伴。

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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行,。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量,。加入一定量的PBS,，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用,。
注意事項(xiàng)：
1.加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí)，可分批次操作,，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差,；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑,；
③作定量試驗(yàn)時(shí),，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,，此外,，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染,。
2.溫育：
①如有兩種溫度,，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件,；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察,；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直,，避免交叉污染,，用力不能過(guò)猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離,；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出,；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中,，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物,，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,，要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A,、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。

豚鼠白介素3介導(dǎo)核因子(NFIL3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

豚鼠雙調(diào)蛋白(AR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠微精蛋白β(MSMβ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠凝血因子ⅩⅢ(F13)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠半胱氨酰白三烯受體1(CYSLTR1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠活化蛋白C(APC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豚鼠血小板球蛋白β(βTG/PBP/CXCL7/NAP2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

rT3反三碘甲狀腺原氨酸ELISA KitIL-17F/IL-24  白介素-17F抗體 規(guī)格: 0.2ml

Lamin B2  核纖層蛋白B2抗體 規(guī)格: 0.2ml

RNF10  環(huán)指蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

BCHE(1E8)  丁酰膽堿酯酶單克隆抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCRK  細(xì)胞周期相關(guān)激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml

APOJ/Clusterin  載脂蛋白J抗體 規(guī)格: 0.1ml

STK25/YSK1  絲氨酸/蘇氨酸激酶25抗體 規(guī)格: 0.2ml

OPCML  片樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

LMP2  低分子質(zhì)量蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

DCAKD  脫磷酸輔酶Ａ結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Bovine IgG/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml

Squalene Epoxidase  鯊烯環(huán)氧酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

ZSWIM2  E3泛素蛋白連接酶ZSWIM2抗體 規(guī)格: 0.2ml

使用方法：
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶,。*,，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測(cè)樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻,。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零,，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。