詳細(xì)介紹
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,,設(shè)計并合成引物,,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報告給您,。
產(chǎn)品名稱:西尼羅病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
貨號:GOY-M6470
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫,、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位),;在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),,一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng),。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,,無放射性污染,、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板,。可直接用臨床標(biāo)本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細(xì)胞,、活PCR技術(shù)概論。
phospho-RPS6KB1(Ser427) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml*
CARD17/INCA 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 規(guī)格: 0.2ml*
IKI3 family protein 擬南芥IKI3抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Resistin 抵抗素抗體 規(guī)格: 0.1ml*
PANK1 泛酸激酶1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
RNF158 心臟蛋酸酶1結(jié)合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Phospho-Rb(Ser612) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
connexin-30 間隙連接蛋白30抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Rabbit Anti-rat IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml*
Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml*
NMP-22 核基質(zhì)蛋白22 0.1ml*
TFPI-2 組織因子途徑抑制劑-2抗體 規(guī)格: 0.1ml*
HO-1 紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體 規(guī)格: 0.1ml*
FUT1 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
PHAP1 蛋酸酶2A抑制劑1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
西尼羅病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)Ferrocenemethanol 羥甲二茂鐵5g瓶
ECH Sepharose 4B 羧基-瓊脂糖凝膠 4B25mL瓶
PNPG 對硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷1g瓶
Iaconazole伊曲康唑5g瓶
Rhodamine 羅丹明1235mg支
Fibrinogen 纖維蛋白原1g瓶
Casein Peptone 酪蛋白胨250g瓶
TE 緩沖液(PH=8.0)500ml瓶
羊抗人白蛋白(免疫血清)0.5ml支
BCIP-NBT底物顯色試劑盒125ml盒
PEG 4000 聚乙二醇 40005kg瓶
PEG 4000 聚乙二醇 4000500g瓶
PEG 3350 聚乙二醇 33501000g瓶
PEG 3350 聚乙二醇 3350100g瓶
NP-40 LYSIS BUFFER 裂解液500ml瓶
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 ,、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2. 為避免RNA降解,,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測,;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),,并單獨(dú)存放,。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用,。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄,。