大鼠真皮成纖維原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代真皮成纖維細(xì)胞 低分化鼻咽癌細(xì)胞 英文名稱： CNE-2 SVP VERO細(xì)胞衍生株 1ml/T75 COS-7L, 非洲綠猴成纖維細(xì)胞 H9c2(2-1) 大鼠心肌細(xì)胞 大鼠原代腸巨噬細(xì)胞

大鼠真皮成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

 

大鼠真皮成纖維細(xì)胞分離自真皮組織,；真皮，位于表皮深層,，向下與皮下組織相連,，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)內(nèi),。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維,，使皮膚既有彈性，又有韌性,。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層,。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì),。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的真皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長,，不聚集成團,；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長，平坦,、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織,。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠真皮成纖維細(xì)胞采用先蛋白酶消化、后蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠真皮成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細(xì)胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng),。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。

LAMP1 Others Rat 大鼠 LAMP1 / CD107a 人細(xì)胞裂解液   SMC-1(人胸膜瘤細(xì)胞)     草魚腎細(xì)胞;GIK  雪旺細(xì)胞生長添加物SCGS  BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞)   293A,，人胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級別) 兔原代小梁網(wǎng)細(xì)胞 小鼠原代胃黏膜成纖維細(xì)胞

ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原

CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白

IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein

ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠乳酸脫氫酶A(LDHA)試劑盒 ，英文名： LDHA ELISA Kit

Mouse angiotensin I (Ang- I) ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒

RatChorionicGonadoophinβ,β-CGELISAKit 大鼠絨毛膜β(β-CG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGzms-B(HumangranzymesB)ELISAKit人顆粒酶B

細(xì)胞同酸激酶(PK)總活性比色法定量試劑盒20次

RatUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit大鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔型纖溶酶原激活物(uPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠真皮成纖維原代細(xì)胞小鼠NOD樣受體-1(NOD-1)試劑盒 96T/48T

Rat hyaluronic acid binding protein (HABP) ELISA Kit 大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)試劑盒

HumahyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 人促甲狀腺素(TSH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCollageypeⅠ,ColⅠ試劑盒人Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性間接比色法定量試劑盒20次

Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit人重組激活基因1(RAG-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CLEC6A重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 Protein

CD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原 0.5mgCD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原)

CCDC134重組人 CCDC134 蛋白 Protein

HNMT Protein Human 重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白