大鼠關節(jié)軟骨原代細胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代關節(jié)軟骨細胞 NCI-H295R(人上腺皮質腺癌細胞) NCI-H2087 人非小細胞肺癌細胞 1ml/T75 PANC-1, 人胰腺癌細胞 Human HBL-100 人整合 SV40基因的上皮細胞 大鼠原代外周血單個核細胞

大鼠關節(jié)軟骨原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

 

大鼠關節(jié)軟骨細胞分離自關節(jié)軟骨組織；關節(jié)軟骨屬于透明軟骨,，表面光滑,、呈淡藍色、有光澤,，它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架,，這種框架呈半環(huán)形，類似拱形球門,，其底端緊緊附著在下面的骨質上,，上端朝向關節(jié)面，這種結構使關節(jié)軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來,，同時當受到壓力時候,，還可以有少許的變形，起到緩沖壓力的作用,。在這些纖維之間,，散在分布著軟骨細胞，軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,，這些軟骨細胞維持關節(jié)軟骨的正常代謝,。關節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配，也沒有血管,，其營養(yǎng)成分必須從關節(jié)液中取得,，而其代謝廢物也必須排至關節(jié)液中,，關節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關節(jié)運動，使關節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,，所以關節(jié)運動對于維持關節(jié)軟骨的正常結構起重要的作用,。關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨陷窩內。幼稚的關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨組織的表層,，單個分布,、體積較小、呈橢圓形,，長軸與關節(jié)軟骨表面平行,，越向深層的關節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形,、染色淺,，細胞質弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴,。成熟的關節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關節(jié)軟骨陷窩內,，這些關節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群,。電鏡下,，關節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體,。在組織切片中,，關節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的關節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠關節(jié)軟骨細胞采用膠原酶聯(lián)合蛋白酶消化制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠關節(jié)軟骨細胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞  CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細胞裂解液   人正常肝細胞;L-02  R 1610倉鼠肺細胞 R 1610 hamster lung cells DMEM+10%FBS  PA319   人大腸癌細胞 小鼠原代腸道干細胞 兔原代心房心肌細胞

Gentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白

EPCAM重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白  Protein

ECM1 Protein Mouse 重組小鼠 ECM1 蛋白 (His 標簽)

SPEG重組人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠細胞色素P450家族成員11B1(CYP11B1)試劑盒 ,，英文名： CYP11B1 ELISA Kit

Mouse adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 小鼠能a1A受體(ADRA1A)試劑盒

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHSP-70ELISAKit大鼠熱休克蛋白70

細胞KUNEL測定試劑盒10次

ELISAKitIL1Ra大鼠白介素1受體拮抗劑

兔白介素17(IL-17)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔乙酰(ACh)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔去甲上腺素(NA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

   ELISA.   96T/48T

大鼠關節(jié)軟骨原代細胞小鼠過氧化酶(GSH-Px)試劑盒 96T/48T

Human retinol binding protein 4 (RBP-4) ELISA Kit 人結合蛋白4(RBP-4)試劑盒

Humanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASA試劑盒人抗骨骼肌抗體(ASA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細胞轉染試劑盒10次

Humanueinsulin,TIELISAKit人真胰島素(TI)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD302重組小鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白  Protein

S100鈣結合蛋白A13(S100A13)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A13 (S100A13)

CALR重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (His 標簽) Protein

FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標簽)

FGFR3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR3 蛋白

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2,、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。