ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多,，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外,，有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素,；
③操作因素,。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結(jié)果,，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù),！

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本,。例如灌洗液,、腦脊液、血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本.
檢測種屬：大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉鼠、裸鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚、人,、等動植物,。
具有如下優(yōu)點：
   一,、高效,、靈敏、特異的抗體,；
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三,、吸附性能好,，空白值低，孔底透明度高的固相載體,；
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,；
五,、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費,。

性能：
1) 準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,，大于等于0.9900。
2) 靈敏度：檢測濃度小于1.0 pg/ml,。
3)特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
4) 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。
5) 貯藏：2-8℃,，避光防潮保存。
6) 有效期：6個月
注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。
3.請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
4.封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
5.底物請避光保存,。
6.嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
8.本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準,。

SP6 RNA Polymerase規(guī)格：2000 units

SP6 RNA Polymerase, HC規(guī)格：5000 units

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase規(guī)格：500 units

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase規(guī)格：2500 units

M-MuLV Reverse Transcriptase規(guī)格：1000 units

M-MuLV Reverse Transcriptase規(guī)格：5000 units

Taq DNA Polymerase (recombinant)規(guī)格：500 units

Taq DNA Polymerase, LC (recombinant)規(guī)格：500 units

Taq DNA Polymerase (recombinant)規(guī)格：5x500 units

Taq DNA Polymerase (recombinant)規(guī)格：10x500 units

Klenow Fragment, exo–規(guī)格：300 units

Klenow Fragment, exo–規(guī)格：1500 units

RevertAid™ Reverse Transcriptase規(guī)格：10000 units

RevertAid™ Reverse Transcriptase規(guī)格：5x10000 units

RevertAid™ H Minus Reverse Transcriptase規(guī)格：10000 units

RevertAid™ H Minus Reverse Transcriptase規(guī)格：5x10000 units

Pfu DNA Polymerase (recombinant)規(guī)格：100 units

Pfu DNA Polymerase (recombinant)規(guī)格：500 units

Pfu DNA Polymerase (native)規(guī)格：100 units

Pfu DNA Polymerase (native)規(guī)格：500 units

TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase規(guī)格：200 units

TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase規(guī)格：500 units

TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase規(guī)格：5x500 units

Bsm DNA Polymerase, Large Fragment規(guī)格：1600 units

ACO-2烏頭酸酶2ELISA Kit操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔,，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl,；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl,。
（2）酶標板置4℃,，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后,，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔,，浸泡1-2分鐘,，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次,。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl,。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),，孵育60min。
（6）洗板,，同（4）,。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min,。
（9）洗板,，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl,，輕輕混勻10s,，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值,。S/N≥2.1為陽性判定標準,。