化工儀器網(wǎng)
資料下載
大鼠（Rat）胰高血糖素ELISA檢測試劑盒使用方法
閱讀：219 發(fā)布時間：2018-10-23| 提 供 商 | 上海谷研實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 75.6KB |
|---|---|---|---|
| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 39次 | |
| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 219次 |
| 免費下載 | 點擊下載 |
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞介素-2（IL-2）水平,。用純化的人白細胞介素-2（IL-2）抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素-2（IL-2），再與HRP標記的羊抗人受體結合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素-2（IL-2）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中人白細胞介素-2（IL-2）含量,。
試劑盒組成
1
20倍濃縮洗滌液
50ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標試劑
6ml×1瓶
8
標準品（12μg/L）
0.5ml×1瓶
3
酶標包被板
12孔×8條
9
標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說明書
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個
大鼠（Rat）胰高血糖素ELISA檢測試劑盒標本處理及要求
1．血清、血漿,、腦脊液,、腹腔液標本可直接測定；
2．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
3．采集后盡早進行實驗，若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融。
操作步驟
標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔,，在*,、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*,、第二孔中加標準品稀釋液50μl,，混勻；然后在*孔和第二孔中先各取50μl棄掉,；再各取50μl分別加到第三孔和第四孔,，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,，混勻后，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中,，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,，混勻,；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中,，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,，混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為8μg/L,，4μg/L ,，2μg/L，1μg/L,，0.5μg/L）,。
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）,、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復5次,，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5,。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。
檢測范圍：
0.4μg/L -10μg/L
規(guī)格：
96人份/盒
大鼠（Rat）胰高血糖素ELISA檢測試劑盒保存條件及有效期
1．試劑盒保存：,；2-8℃,。
2．有效期：6個月