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一,、人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701]簡(jiǎn)介
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二,、細(xì)胞收到后處理
 
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法,。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,，先打開外包裝,，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),，嚴(yán)格無(wú)菌操作,。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí),，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液,，懸浮細(xì)胞需離心處理,，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng),；超過80%匯合度時(shí),，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
 
三,、細(xì)胞培養(yǎng)步驟
 
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中,，加入約6ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
 
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 
1,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
 
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
 
2,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701]傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
 
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集,，1000RPM條件下離心5分鐘,，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,，凍存比例為90%FBS+10%DMSO,。
YSRIBIO656    Minoxidil     敏諾西代標(biāo)準(zhǔn)品    38304-91-5     125mg    
YSRIBIO657    Minocycline Hydrochloride     鹽酸二甲胺四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品    13614-98-7     200mg    
YSRIBIO658    Mineral Oil     礦物油標(biāo)準(zhǔn)品    8012-95-1     1．5ml    
YSRIBIO659    Milrinone     米力農(nóng)標(biāo)準(zhǔn)品    78415-72-2     500mg    
YSRIBIO660    Milbemycin Oxime     米爾貝肟標(biāo)準(zhǔn)品    129496-10-2     200mg    
人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701]