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腫瘤細胞培養(yǎng)成功關(guān)鍵在于：取材,、成纖維細胞的排除,、選用適宜的培養(yǎng)液和培養(yǎng)底物等幾個方面,。在具體培養(yǎng)方法方面,，腫瘤細胞培養(yǎng)與正常組織細胞培養(yǎng)并無原則差別,，初代培養(yǎng)應(yīng)用組織塊和消化培養(yǎng)法均可。

1.取材：

人腫瘤細胞來自外科手術(shù)或活檢瘤組織,。取材部位非常重要,，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區(qū),，取材時盡量避免用退變組織，要挑選活力較好的部位,。癌性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是好的培養(yǎng)材料,。取材后宜盡快進行培養(yǎng)，如因故不能立即培養(yǎng),，可貯存于4℃中,，但不宜栽過24小時。

2.培養(yǎng)基：

腫瘤細胞對培養(yǎng)基的要求不如正常細胞嚴格,，一般常用的 RPMIl640,、 DMEM、Mc-Coy等培養(yǎng)基等皆可用于腫瘤細胞培養(yǎng),。腫瘤細胞對血清的需求比正常細胞低,，正常細胞培養(yǎng)不加血清不能生長，腫瘤細胞在低血清培養(yǎng)基中也能生長,。腫瘤細胞對培養(yǎng)環(huán)境適應(yīng)性較大,，是因腫瘤細胞有自泌(Autocrine)性產(chǎn)生促生長物質(zhì)之故。但這并不說明腫瘤細胞*不需要這些成分,。按不同細胞需要不同的生長因子;腫瘤細胞與正常細胞之間,、腫瘤細胞與腫瘤細胞之間對生長因子的需求都存在著差異。但大多數(shù)腫瘤細胞培養(yǎng)中仍需要生長因子,。有的還需特異性生長因子〔如乳腺癌細胞等),。總之培養(yǎng)腫瘤細胞仍需加血清和相關(guān)生長因子培養(yǎng)更易成功,。

3.成纖維細胞的排除：

成纖維細胞常與腫瘤細胞同時混雜生長,，致難以純化腫瘤細胞。而且成纖維細胞常比腫瘤細胞生長得快,，zui終能壓制腫瘤細胞的生長,。因此排除成纖維細胞成為腫瘤細胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵。排除成纖維細胞有多種方法,。