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介紹一下人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒的操作方法
本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被有人載脂蛋白 A1(apo-A1)捕獲抗體的微孔中,,依次加入樣本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記的檢測抗體,HRP 酶結(jié)合物,,中間經(jīng)過溫育和洗滌,,用底物 TMB 顯色,TMB 在過氧化物酶(HRP)的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人載脂蛋白 A1(apo-A1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度,。
靈敏度:15.1ng/mL
apo-A1 簡介
載脂蛋白A1是一種蛋白質(zhì),由APOA1基因編碼。作為高密度脂蛋白顆粒的主要成分,,它在脂質(zhì)代謝中具有特殊作用,。APOA1基因位于第11條染色體上,具體位置為11q23-q24,,該基因包含4個(gè)外顯子,。APOA1編碼一個(gè)28.1kDa的蛋白質(zhì),由243個(gè)氨基酸組成,;通過質(zhì)譜數(shù)據(jù)觀察到21個(gè)肽,。載脂蛋白A1是血漿中高密度脂蛋白顆粒的主要蛋白成分。從腸道細(xì)胞分泌的乳糜微粒也含有載脂蛋白A1,,但它在血液中迅速轉(zhuǎn)移到高密度脂蛋白,。該蛋白作為高密度脂蛋白顆粒的一個(gè)組成部分,通過接受細(xì)胞內(nèi)的脂肪(包括動(dòng)脈壁內(nèi)的巨噬細(xì)胞,,這些巨噬細(xì)胞已被氧化的低密度脂蛋白顆粒攝入的脂肪超載),,使脂肪分子外流到其他地方,包括回到低密度脂蛋白顆?;虻礁闻K排泄出來,。
介紹一下人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒的操作方法
結(jié)果判斷:
1. 計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品和樣本復(fù)孔的平均 OD 值并減去空白孔的 OD 值作為校正值。以濃度為橫坐標(biāo),,OD 值為縱坐標(biāo),,在雙對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出四參數(shù)邏輯函數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(作圖時(shí)去掉空白組的值)。
2. 若樣品 OD 值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測并在計(jì)算樣本濃度時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
典型數(shù)據(jù)和參考曲線:以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
注意:本圖僅供參考,應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本含量,。
試劑盒性能: