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上海仁捷生物科技有限公司
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上海仁捷生物人Tau蛋白（Tau）ELISA試劑盒的靈敏度怎么樣,？
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被人Tau蛋白（Tau）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人Tau蛋白（Tau）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。
試劑盒性能
1. 檢測(cè)范圍：75 pg/mL – 2400 pg/mL,。
2. 靈敏度：檢測(cè)濃度小于10 pg/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
4. 重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,，板間變異系數(shù)小于15% 。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
以所標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，并得到直線回歸方程,，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算出樣品的濃度,。
而配對(duì)抗體作為核心試劑,，是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵因素，是真正意義上的CP,。并非所有抗體都能應(yīng)用于ELISA應(yīng)用,，必須對(duì)單個(gè)抗體進(jìn)行評(píng)估,。首要關(guān)注抗體識(shí)別的免疫原區(qū)域輔助抗體對(duì)的選擇。對(duì)于雙抗夾心法CP選擇有竅門,，其中一個(gè)抗體作為捕獲抗體包被在多孔板表面,，固定抗原。另一個(gè)則被偶聯(lián),，用于抗原的檢測(cè),。兩個(gè)抗體必須與同一抗原不同表位發(fā)生反應(yīng)。即如果抗原通過捕獲抗體固定在平板上,，那么檢測(cè)抗體必須能夠與其他表位相互作用,，而不會(huì)受到捕獲抗體或平板的位阻。目前市面上也有很多供應(yīng)商提供驗(yàn)證過夾心法ELISA的抗體對(duì),，可以依據(jù)實(shí)際情況選擇,。
