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人癌胚抗原ELISA檢測(cè)試劑盒-實(shí)驗(yàn)說明書
儲(chǔ)存及有效期:
未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意,,收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TMB 洗滌液,,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃,。
使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,,避免潮濕,。
實(shí)驗(yàn)原理:
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),,計(jì)算樣品濃度,。
精密度:
精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低,、中,、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20次,,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中,、高值定值樣本定量測(cè)定,,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值,。
批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%
穩(wěn)定性:
經(jīng)測(cè)定,,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,,其活性降低率小于5%,。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件,。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差,。
友情提醒:
試劑盒使用完畢后,請(qǐng)妥善處理相關(guān)耗材,,避免環(huán)境污染,!
人癌胚抗原ELISA檢測(cè)試劑盒-實(shí)驗(yàn)說明書
操作時(shí)應(yīng)注意:
A. 使用移液器加液與移液槍頭不能混用,。
B. 洗板要干凈,避免交叉污染,。
C. 嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,,反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。
D. 請(qǐng)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,,操作完成注意做好清潔工作,。
E. 不要在測(cè)量過程中關(guān)閉電源。
F. 對(duì)于因試劑盒問題造成的測(cè)量結(jié)果的偏差,,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改酶免測(cè)定試劑盒參數(shù),以達(dá)到zui佳效果,。
G. 使用后蓋好防塵罩,。
H. 出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家,切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀,。