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人光蛋白聚糖ELISA檢測(cè)試劑盒分析檢測(cè)
1,、血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2,、血漿:EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,,取上清液,。
5、保存:如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù),。
1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性.
2.若不同批號(hào)人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),,或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形,。
3.反應(yīng)時(shí)間的誤差,,做大量標(biāo)本時(shí),Di一孔和最后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大,。
4.臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正?,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免,??梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
人光蛋白聚糖ELISA檢測(cè)試劑盒分析檢測(cè)
準(zhǔn)備試劑,,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板4次,,加入顯色液A、B,,37℃顯色15分鐘
加入終止液
15分鐘之內(nèi)讀OD值
ELISA試劑盒可特異性定量測(cè)定疾病相關(guān)蛋白,,包括細(xì)胞因子、趨化因子,、β淀粉樣蛋白與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)靶標(biāo),。
■靈敏,準(zhǔn)確和一致的性能
■用血清,、血漿,、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進(jìn)行過(guò)驗(yàn)證
■在半天內(nèi)可完成的現(xiàn)成,方便的檢測(cè)