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山梨醇脫氫酶測(cè)試盒分析說(shuō)明
產(chǎn)品說(shuō)明： SDH（EC 1.1.1.14）催化山梨醇脫氫生成果糖,，是調(diào)控生物體內(nèi)山梨醇含量的關(guān)健酶之一,。SDH 催化山梨醇 脫氫生成果糖,，同時(shí)還原 NAD+生成 NADH，生成的 NADH 能將電子傳遞給 NBT 生成紫色的甲臜,，根據(jù)這一原 理可以計(jì)算 SDH 活性,。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿,、研缽/勻漿器,、冰和蒸餾水。
山梨醇脫氫酶測(cè)試盒分析說(shuō)明
樣本處理
1,、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10 4個(gè)）：提取液體積 （mL）為 500~1000：1 的比例加入提取液（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1 mL 提取液）,，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì) 胞（冰浴,，功率 20%或 200W，超聲 3s,，間隔 10s,，重復(fù) 30 次）；8000 ×g 4℃離心 10 min,，取上清,，置冰上待 測(cè)。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1 g 組織,，加入 1 mL 提取液）,， 進(jìn)行冰浴勻漿。8000 ×g 4℃離心 10 min,，取上清,，置冰上待測(cè)。
3,、血清（漿）樣本：直接檢測(cè),。
