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β-淀粉酶測試盒微量法實驗科研
測定意義:淀粉酶負責水解淀粉,主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶,。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可隨機地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,,生成葡萄糖,、麥芽糖、麥芽三糖,、糊精等還原糖,。
測定原理:還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。α-淀粉酶不耐酸,,β-淀粉酶不耐熱,。根據(jù)上述特性,鈍化其中之一,,就可測出另一種淀粉酶的活力,。
β-淀粉酶測試盒微量法實驗科研
需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋,、離心機,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板,、研缽和蒸餾水,。
樣本處理
稱取約 0.1g 樣本,加入 0.8mL 蒸餾水,,研磨勻漿,;將勻漿倒入離心管中,提取液在室溫下放置提取 15min,, 每 5min 振蕩 1 次,,使其充分提取,;6000g,,常溫離心 10min,,取上清液加蒸餾水定容至 10mL,搖勻,,即淀粉酶原 液,。
吸取上述淀粉酶原液 1mL,,加入 4mL 雙蒸水,,搖勻,,即為淀粉酶稀釋液,用于(α+β)淀粉酶總活力的測定,。