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測定意義：線粒體復(fù)合體Ⅲ（EC 1.10.2.2）又稱CoQ-細胞色素C還原酶,，廣泛存在于動物,、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體中,，是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分,，負責把還原型CoQ的氫傳遞給細胞色素C,，生成還原型細胞色素C。
測定原理：與氧化型細胞色素C不同,，還原型細胞色素C在550nm有特征光吸收,，因此550nm光吸收增加速率能夠反映線粒體復(fù)合體Ⅲ酶活性。
需要的儀器,，耗材:可見分光光度計/酶標儀,、臺式離心機、水浴鍋,、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板、研缽,、冰和蒸餾水,。
樣本處理
1、 稱取約0.1g組織或收集500萬細胞,，加入1.0 mL提取液,，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
2,、 4 ℃ 600 g離心10min,。將上清液移至另一離心管中，4 ℃ 11000 g離心15min,。
3,、 上清液即胞漿提取物，可用于測定從線粒體泄漏的復(fù)合體Ⅲ（此步可選做,，可以判斷線粒體提取效果）,。
4、 在沉淀中加入200μL提取液,，超聲波破碎（功率20%,，超聲5秒，間隔10秒,，重復(fù)15次）,，用于復(fù)合體Ⅲ酶活 性測定，并且用于蛋白含量測定,。
