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測定意義：GSH/GSSG是細胞內(nèi)重要的氧化還原對之一,。因此,，測定細胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,，能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態(tài)，也是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的主要指標之一,。

測定原理：利用2-VP法測GSSG含量,。

需要的儀器，耗材:低溫離心機,、水浴鍋,、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板,、和蒸餾水。


樣本處理

（1）組織處理 新鮮組織首先用 PBS 沖洗 2 次,，然后稱取動物組織或者植物組織 0.1g,。加入用試劑一潤洗過的勻漿器中（勻 漿器提前放冰上預(yù)冷）；然后加入 1mL 試劑一（組織/試劑一比例保持不變即可）,，迅速冰上充分研磨（使用液氮 研磨效果更好）,；8000g，4℃離心 10min,；取上清液放置于 4℃待測,，若暫時不能完成測試可放于-80℃保存（可保 存 10 天）。


（2）血液處理 血漿：將收集的抗凝血于 4℃,，600g 離心 10 分鐘,，吸取上層血漿到另一支試管中，加入等體積的試劑一,，4℃,， 8000g 離心 10 分鐘，將上清移入新的試管中放置于 4℃待測,，若暫時不能完成測試可放于-80℃保存（可保存 10 天）,。 血細胞：將收集的抗凝血于 4℃，600g 離心 10 分鐘,，棄去上層血漿用 3 倍體積的 PBS 清洗 3 次（用 PBS 重懸血 細胞,，600g 離心 10 分鐘），加入等體積試劑一,，混勻后 4℃放置 10 分鐘,，8000g 離心 10 分鐘，吸取上清放于 4℃ 待測,，若暫時不能完成測試可放于-80℃保存（可保存 10 天）,。

（3）細胞處理 收集不少于 10 6個細胞，首先用 PBS 清洗細胞 2 次（PBS 重懸細胞,，600g 離心 10 分鐘）,，加入 3 倍細胞沉淀 體積的試劑一重懸細胞，反復(fù)凍融 2-3 次（可在液氮中凍結(jié),，37℃水浴中溶解）,，8000g 離心 10 分鐘，收集上清于 4℃待測,，若暫時不能完成測試可放于-80℃保存（可保存 10 天）,。