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大鼠嗜鉻粒蛋白AELISA試劑盒洗板方法
注意要點(diǎn):請仔細(xì)閱讀產(chǎn)品的詳細(xì)使用說明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。
特異性:同時(shí)檢測天然或重組的,,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng),。
檢測種屬:人,、大小鼠、兔,、羊,、猴、豬,、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),,禁用于臨床
標(biāo)本:血清,、,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水、組織等,。
運(yùn)輸方面:現(xiàn)貨供應(yīng),,一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法,、競爭法以及BAS-ELISA等,。
服務(wù)承諾:工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)技術(shù)咨詢和指導(dǎo),提供來樣檢測及免費(fèi)代測服務(wù),,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。
研究領(lǐng)域:炎癥研究,、生物學(xué),、研究、新陳代謝,、信號通路、免疫學(xué),、傳染病,、其他研究。
免費(fèi)代測,,從標(biāo)本收集、保存,、預(yù)試驗(yàn),、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo),。
1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融,。z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值。