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大鼠白三烯E4ELISA試劑盒操作說明
Elisa試劑盒 性能:
1．準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
2．靈敏度：zd檢測濃度小于10 pg/ml。
3．特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應,。
4．重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。
貯藏：2-8℃,，避光防潮保存。
有效期：6個月
樣本處理及要求
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,，然后1000×g離心20 分鐘,，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融,。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,，可以對勻漿液進行超聲破碎,，或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,，取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測,，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響后檢測結(jié)果,，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。
【樣本收集保存】
1、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細胞刺激,，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2,、血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。
3、細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。
5,、保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃,，避免反復凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
