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大鼠激活素AELISA試劑盒操作步驟
Elisa試劑盒 性能:
1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,,大于等于0.9900,。
2.靈敏度:z低檢測濃度小于10 pg/ml,。
3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應,。
4.重復性:板內,、板間變異系數(shù)均小于15%,。
貯藏:2-8℃,,避光防潮保存,。
有效期:6個月
樣本處理及要求
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,,或將上清置于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。
注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測,。
【樣本收集保存】
1,、血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2、血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉離心30分鐘取上清。
3,、細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉離心10分鐘取上清,。
5、保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。