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小鼠PI3KELISA試劑盒洗板方法
樣本處理及要求
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,,然后1000×g離心20 分鐘,,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,,或將上清置于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或將上清置于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結果,,因此溶血標本不宜進行此項檢測,。
小鼠PI3KELISA試劑盒洗板方法
【樣本收集保存】
1、血清:使用不含熱原和內毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2,、血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉離心30分鐘取上清,。
3、細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉離心10分鐘取上清。
5,、保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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