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小鼠乙酰膽堿ELISA試劑盒操作說明書
性狀：盒裝液體
貯藏條件：2-8℃低溫保存
有效期：6個月
用途：科研與實驗試劑,，不得用于臨床診斷。
特異性：同時檢測天然或重組的,，且與其他相關蛋白無交叉反應,。
檢測種屬：人、大小鼠,、兔,、羊、猴,、豬,、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬,。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床
標本：血清,、,、細胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
ELISA常用的方法：雙抗體夾心法,、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等,。
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融,。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果）,，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融,。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,，取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4. 除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內,，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
