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豬多肽YYELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟
性狀:盒裝液體
貯藏條件:2-8℃低溫保存
注意要點(diǎn):請(qǐng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品的詳細(xì)使用說(shuō)明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果,。
用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,,不得用于臨床診斷,。
特異性:同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng),。
檢測(cè)種屬:人,、大小鼠、兔,、羊,、猴、豬,、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬,。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床
標(biāo)本:血清,、,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
運(yùn)輸方面:現(xiàn)貨供應(yīng),,一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法,、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等,。
服務(wù)承諾:工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)技術(shù)咨詢和指導(dǎo),,提供來(lái)樣檢測(cè)及免費(fèi)代測(cè)服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性,。
研究領(lǐng)域:炎癥研究,、生物學(xué)、研究,、新陳代謝,、信號(hào)通路、免疫學(xué),、傳染病,、其他研究。
免費(fèi)代測(cè),,從標(biāo)本收集,、保存,、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn),、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過(guò)程提供完整的技術(shù)指導(dǎo),。
豬多肽YYELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融,。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測(cè)。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測(cè),,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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