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上海仁捷生物科技有限公司
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兔神經(jīng)生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟
性狀：盒裝液體
貯藏條件：2-8℃低溫保存
有效期：6個(gè)月
注意要點(diǎn)：請(qǐng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品的詳細(xì)使用說(shuō)明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果,。
用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑，不得用于臨床診斷,。
特異性：同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬：人,、大小鼠,、兔,、羊、猴,、豬,、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),，禁用于臨床
標(biāo)本：血清,、、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
運(yùn)輸方面：現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸,，江浙滬隔天到,，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨
ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法,、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等,。
服務(wù)承諾：工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)和指導(dǎo)，提供來(lái)樣檢測(cè)及免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性,。
研究領(lǐng)域：炎癥研究、生物學(xué),、研究,、新陳代謝、信號(hào)通路,、免疫學(xué),、傳染病、其他研究,。
免費(fèi)代測(cè),，從標(biāo)本收集、保存,、預(yù)試驗(yàn),、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過(guò)程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。
1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜后于1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測(cè),，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果）,，稱(chēng)重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,，或反復(fù)凍融,。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè),。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,；空白孔不加,。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
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