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ELISA試劑盒廠家推薦:Canine VE ELISA Kit
Elisa試劑盒 性能:
1.準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900,。
2.靈敏度:低檢測濃度小于10 pg/ml,。
3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4.重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%,。
貯藏:2-8℃,避光防潮保存,。
有效期:6個月
樣本處理及要求
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
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注:標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果,,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
【樣本收集保存】
1,、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2,、血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。
3,、細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5,、保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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