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小鼠一磷酸腺苷(AMP)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse AMP ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:50 nmol/L – 1600 nmol/L
低檢測限:10 nmol/L
應用范圍:血清,、血漿,、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預先包被小鼠一磷酸腺苷(AMP)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠一磷酸腺苷(AMP)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
操作步驟
- 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
- 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
- 樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加。
- 除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
- 棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
- 每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
- 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值,。