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綿羊白介素10(IL10)ELISA檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
品牌:仁捷生物
特點(diǎn):靈敏性高,、特異性強(qiáng),、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,,不得用于臨床診斷
試劑盒種屬:羊,、雞,、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉(cāng)鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛等動(dòng)植物,。
待檢樣本:體液、血清,、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液,、組織勻漿,、心房水標(biāo)本等等。
綿羊白介素10(IL10)ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本的采集及保存
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存 過(guò)程 中 如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
3.尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清,。 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,。通過(guò)反復(fù)凍融,,以 使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用,。
綿羊白介素10(IL10)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL,;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。