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骨鈣素ELISA試劑盒（種屬：小鼠）實驗檢測ELISA試劑盒特點
一 ,、靈敏、特異的抗體,；
二,、穩(wěn)定的重復性和可靠性,；
三,、吸附性能好,，空白值低,，孔底透明度高的固相載體；
四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標本類型；
五,、節(jié)省實驗經(jīng)費,。
骨鈣素ELISA試劑盒（種屬：小鼠）實驗檢測ELISA試劑盒操作步驟：
1. 加標準品：在酶標包被板上設標準品孔，依次加入不同濃度的標準品50ul(建議每個濃度做2個平行孔)
2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同),、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,，然后再加樣品親和素10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用,。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復5次,，拍干,。
6. 加酶：除空白孔外每孔加入酶標試劑50μl。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
骨鈣素ELISA試劑盒（種屬：小鼠）實驗檢測標本的采集及保存
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融,。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融,。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測,，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響后檢測結果,，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。
4. 細 胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右 （2000-3000轉/分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。
5. 組 織標本：切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
骨鈣素ELISA試劑盒（種屬：小鼠）實驗檢測應用領域：僅供科研使用,，不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書,。
